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    详细内容

    动物成瘤模型

    胰腺癌动物模型

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    胰腺癌是一种恶性程度高、预后极差的肿瘤。胰腺癌发病隐匿,很难早期诊断,并且易发生肝脏转移、腹膜播散或者局部复发以及对化疗药物不敏感等特性。以前的胰腺癌模型多是采用裸鼠建模,但在肿瘤研究方面,由于裸鼠没有正常的免疫系统,缺乏胸腺,不具备T细胞免疫,故对异种移植不产生排斥反应,由于缺乏免疫功能,使得裸鼠胰腺癌发病机制与人不同,而地鼠在形态学及免疫学等方面与人较为相似。其主要表现的特点是潜伏期短、生长迅速、转移早且转移率高,同时还保持了胰腺癌的生理和解剖特性。因此,地鼠胰腺癌原位移植模型是体内研究人胰腺癌的理想模型。



    造模方法

    1.建立地鼠胰腺癌细胞株

    用甲硝二胺诱导地鼠胰腺导管癌,肿瘤组织用剪刀剪成1立方毫米肿瘤块,并用套针植入地鼠肩胛区皮下,6~8周后处死动物,切除肿瘤后反复传代种植,第8次种植后切除肿瘤组织,用0.5g/L的胰蛋白酶消化,37℃下 EDTA处理10分钟,1000r/min离心10分钟,收集细胞,于含100ml/L胎牛血清的DMEM培养液中培养,并加100U/L青霉素和链霉素、100mg/L卡那霉素以及100mg/L两性霉素B,反复传代,建立细胞株。

    2.地鼠胰腺癌原位移植模型建立

    地鼠胰腺癌细胞株于DMEM培养液中稳定传代5~6代,观察细胞增殖旺盛时终止培养,用无血清DMEM培养液制备细胞悬液,调整细胞密度至1×10000000000/L,以60mg/kg腹腔注射戊巴比妥钠,取腹部正中切口,牵出胰腺,于脾门较宽大处胰腺背膜下注射1×1000000/L地鼠胰腺癌细胞悬液后常规关腹。



    模型特点

    地鼠胰腺癌模型的特点是潜伏期短、生长迅速、转移早且转移率高,同时还保持了胰腺癌的生理和解剖特性。其病理学特征主要表现为移植瘤呈圆形或椭圆形,表面凹凸不平,外观呈粉红色,切面呈灰白色,部分中心有坏死,肿瘤组织质地较脆。镜检下见肿瘤细胞呈多角形或不规则形,胞质淡染,胞核大而圆,异型性明显,肿瘤细胞结节状生长,排列成实体巢形,内有小的血窦,与人的低分化胰腺癌基本一致。


    地鼠胰腺癌细胞株必须在体外传代稳定后,才可用于接种地鼠,同时接种前细胞必须处于对数生长期。



    模型评估和应用

    地鼠胰腺癌细胞株比人类的肿瘤细胞具有更强增殖能力且转移率高。胰腺癌细胞株皮下移植模型、脾内注射肝转移模型和外科胰腺原位移植模型均为常见的胰腺癌造模方法,但脾内注射肝转移模型的肝脏转移侵袭力较强。


    目前已有大量的胰腺癌动物模型,但大都是裸鼠模型,由于裸鼠是免疫缺陷动物,其发病机制也和人不同,所以,利用地鼠建立胰腺癌动物原位模型是研究胰腺癌生物特性及对胰腺癌药物筛选的有效工具。



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