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    脑缺血、心肌缺血模型

    诱发性局部脑缺血模型

    造;
    人的脑血管阻塞以大脑中动脉最为常见,在阻断大鼠大脑中动脉后,可引起大脑半球皮层和基底核缺血性损伤,以海马CA1最为敏感。和人的病理改变相似。


    实验方法
    1.大鼠永久性大脑中动脉栓塞
    不同品种大鼠在阻断大脑中动脉(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后脑梗死面积(体积)的大小和恒定性不同,Sprague-Dawley大鼠最为常用。MCAO引起的脑梗死范围与年龄无关,一般用250~350g体重的大鼠,雌雄均可,但以雄性为宜。目前比较标准方法是:以12%水合三氯yi醛麻醉(350mg/kg,ip)大鼠,侧卧位固定于手术台上,头皮切口,分离颞肌,取外眦和外耳门连线的中点,用牙科钻或环形颅钻钻开颅骨、暴露MCA,在手术显微镜下辨认大脑中动脉及其分支,在分支的下方即MCA的近段,分离结扎或烧灼MCA,注意;つ宰橹馐芩鸷,取颈部切口分离结扎同侧的颈总动脉(common carotid artery,CCA)。电凝时为避免电凝不完全所致的出血,尽量将MCA挑起,使血管内血量减少。另外,为;ぶ芪ё橹馐茏粕,可用湿棉球;。阻断大脑中动脉后用小块肌肉组织轻敷于颅窗上,然后逐层缝合伤口,术后回笼饲养。以上过程均在室温恒定(24~25℃)情况下进行,以利于评价脑缺血的程度。然后用一小块肌肉轻敷颅骨窗口,逐层缝合后,将动物放回笼中。

    2.大鼠短暂性MCAO(缺血-再灌)模型
    体重350~450g大鼠,麻醉后大鼠仰卧固定,颈部正中切口约2cm,在肩胛舌骨和胸锁乳突肌形成的三角处暴露右(或左)侧CCA及其分支颈外动脉(external carotid artery,ECA)和颈内动脉(intemal carotid artery,ICA)。结扎ECA的分支枕动脉、甲状腺上动脉及ECA终末支,分离 ICA的颅外分支翼突腭动脉。夹闭CCA、ICA,自 ECA插入一端加热成圆珠状(直径<0.3mm)的尼龙线并将其导入ICA,松开ICA夹,继续将尼龙线插入颅内至大脑中动脉的起始部位,感到阻力明显时,即可阻断MCA,此时插入的尼龙线长约20mm(自颈内外动脉分叉处算起)。若要研究缺血再灌注,由颈外动脉进入大脑中动脉,然后再将尼龙线往回抽到颈外动脉处,就可进行再灌注。


    模型特点

    本法手术成功率高,缺点为操作较为复杂。根据每批动物MCA的侧支丰富程度不同,产生梗死面积约在15%~24%。阻断MCA的部位与梗死面积有很大关系,将豆状纹状体动脉和皮层分支与MCA远端的侧支循环分开,在MCA开口处与大脑下静脉之间,或嗅束外端2mm接近MCA部位烧灼MCA较长一段,则可引起较恒定的大脑皮层和基底神经核团的梗死。若烧灼靠近嗅束很短一段MCA,则只有2/3动物出现脑梗死。


    心肌缺血动物模型

     

    复制方法:

           体重250~350g雄性Wistar大鼠,用3%戊巴比妥钠按30mg/kg体重的剂量腹腔注射麻醉,仰卧固定于手术台上,将针状电极插入大鼠四肢皮下连接心电图机,记录标准Ⅱ导联心电图,用大半个橡皮球(大小正好套住大鼠头颈部)连接呼吸机进行人工呼吸,呼吸频率90次/ min,潮气量10~12ml/kg,呼吸比设为1:1。去除左前胸毛发,消毒铺巾,顺肋间隙方向于胸骨左旁第3、第4肋间切开皮肤,长约1cm,逐层分离皮下组织、肌肉,于第3、第4肋骨间撑开进胸,向右上方推开胸腺,可暴露心脏及大血管根部,切开心包,轻轻挤大鼠胸廓,将心脏挤出,或做一个和心脏直径一般大小的带柄环套住心脏轻轻拉出,有部分动物在左心耳下缘与肺动脉圆锥间可以看见左冠脉前降支起始部,用无损伤缝针,进针深度控制在0.1cm,宽度为0.1~0.2cm;回纳心脏入胸廓,待动物的数十次心动周期后,收线结扎;观察数分钟后,彻底止血后逐层关胸。关胸过程中于切口内放置排气管(用小儿头皮针的软管自制),闭胸毕,抽空胸腔积气后拔除排气管;指创笫笞灾骱粑,清除气管内分泌物,气管切口及颈部切口开放,不作缝合。手术过程中分别于开胸后、缝针后、结扎后和闭胸后4个点记录心电图变化;合格动物2周及6周后均复查心电图。以上手术均在严格无菌条件下进行。术后肌内注射青霉素钠2×100000U/d,连续注射5d以防感染。

     


    模型特点:

           本模型制作方法简单可行,动物存活率高;用橡皮球套住头颈部进行人工呼吸,可不必切开气管,减少了手术损伤。术后闭胸可较长时间喂养。但大鼠冠脉侧支循环丰富,变异性较大,模型欠稳定,需标本量较大以充分筛选。


     

    比较医学:

           大鼠冠脉结扎后,其6周时心肌梗死面积较2周时明显增加,心电图变化与临床相似。提示大鼠心肌梗死后同样也经历与临床接近的心室重构过程,心肌梗死模型能较好地反映临床的病理过程;但同时要注意到人冠脉管壁增龄变化显著,大鼠冠脉无明显增龄变化,二者间种属差异较显著,这种比较解剖学上的差异,又提示用动物实验研究结果解释人类某些机制时需持慎重态度。

     


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